Guanidintiocyanat 593-84-0 letter utvinningen av nukleotider og peptider fra dyrs innvoller

Guanidintiocyanat | 593-84-0 | er en sterk proteindenaturant. Det er et hvitt krystallinsk pulver, irriterende og følsomt for lys. Det er løselig i etanol og vann, med et smeltepunkt på 118℃. Guanidintiocyanat brukes hovedsakelig til denaturering, lysis av celler og ekstraksjon av RNA og DNA. Det er en vanlig kjemisk komponent for nukleinsyreekstraksjon.

Patent cn111500664a beskriver en fremgangsmåte for å ekstrahere nukleotider og polypeptider fra dyrs innvoller ved bruk av guanidintiocyanat. Nukleotider er forbindelser sammensatt av purinbase eller pyrimidinbase, ribose eller deoksyribose og fosforsyre, som er mye brukt i medisin, mor- og barnprodukter, krydder og mattilsetningsstoffer. Polypeptid er α- Forbindelser dannet av aminosyrer koblet sammen av peptidbindinger er mellomprodukter av proteinhydrolyse, som involverer ulike felt av menneskelige hormoner, nerver, cellevekst og reproduksjon. Deres betydning ligger i å regulere de fysiologiske funksjonene til ulike systemer og celler i kroppen, aktivere relevante enzymer i kroppen, fremme permeabiliteten til den mellomliggende metabolske membranen, eller kontrollere DNA-transkripsjon eller påvirke spesifikk proteinsyntese, til slutt produsere spesifikke fysiologiske effekter.

Dyr innvoller er rike på nukleotider og peptider, men for tiden utføres ekstraksjonen av nukleotider og peptider for det meste separat, noe som resulterer i sløsing med ressurser og komplekse prosesser. Guanidintiocyanat er nyttig for å trekke ut nukleotider og peptider fra dyreorganer. De spesifikke metodene er som følger:

Vask først innvollene til ferske dyr, tøm dem, hakk dem opp, mos dem, tilsett avionisert vann for å oppnå den blandede løsningen, tilsett deretter guanidintiocyanatløsningen til den blandede løsningen, vibrer og bland godt, og stå deretter. Deretter tilsettes en bærer som inneholder silika, fordi guanidintiocyanat vil spalte cellene, og nukleotidene som frigjøres fra cellene vil bli kombinert med silikabæreren. Ta ut bæreren som inneholder silika, absorber og separer den med elueringsmiddel for å oppnå rensede nukleotider.

Deretter tilsettes NaCl -løsning til den gjenværende oppløsningen som silika -bæreren er tatt ut fra, den blandede løsningen ekstraheres, deretter tilsettes komposittprotease, deretter utføres mikrobølgeenzymatisk hydrolyse, den enzymatiske hydrolyseoppløsningen oppvarmes i et vannbad , sentrifugert, blir supernatanten tatt, og polypeptidet oppnås etter frysetørking.

Denne metoden benytter seg av egenskapene til at guanidintiocyanat kan ødelegge cellestrukturen og denaturere proteinet. Det kan ikke bare trekke ut nukleotider og peptider suksessivt, men har også fordelene med enkel metode og høy effektivitet. Samtidig unngår det også problemet med reaksjon mellom biokjemiske reagenser ved tilsetning av biokjemiske reagenser for ekstraksjon.